將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上,洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

　　實驗開始前，用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。

　　編號：將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

　　加樣反應(yīng)：加標準品或樣本50?l/孔到各自的微孔中，然后加酶標記物50?l/孔，再加入50?l/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘。

　　洗滌：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250?l/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

　　顯色：每孔加入底物液A50?l，再加底物液B50?l，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。

　　終止：每孔加入終止液50?l，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。

　　測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

　　呋喃唑酮快速檢測試劑盒結(jié)果分析

　　百分吸光率的計算

　　標準液或樣本的百分吸光率等于標準液或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以個標準液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即所得

　　呋喃唑酮快速檢測試劑盒注意事項

　　1.室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫（25℃）會導致所有標準的OD值偏低。

　　2.在所有孵育過程中，用蓋板膜封住微孔板，避免光線照射。

　　3.混合要均勻，洗板要*，在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性。

　　4.在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。

　　5.顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位（A450nm< 0.5 ）時，表示試劑可能變質(zhì)。

　　6.不要使用過了有效期的試劑盒，不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

　　7.反應(yīng)終止液有腐蝕性，避免接觸皮膚。